Fra DNA-fragment til rekombinant plasmid

Følg fysisk DNA-manipulasjon fra plasmidvektor og insert til et rekombinant konstrukt.

Slik leser du visualet

Finn først origin, seleksjonsmarkør og insertområde; følg deretter kutt → kompatible ender → annealing → ligering.

Faglig gjennomgang

1. En plasmidvektor trenger relevante funksjonelle elementer, blant annet origin for replikasjon i riktig vert og en måte å identifisere ønskede celler på.
2. Vektor og insert må ha ender som kan settes sammen i den valgte kloningsstrategien.
3. Annealing holder kompatible DNA-ender sammen, mens ligase forsegler brudd i ryggraden.

Nøkkelbegreper

plasmid · vektor · insert · origin · seleksjonsmarkør · DNA-ligase

Bruk på prøve og eksamen

Forklar hvorfor både endekompatibilitet og ligase trengs; ikke stopp ved at DNA-delene bare ligger ved siden av hverandre.

Relatert fagstoff

• Tilbake til Visual-kapittelet
• Biologi 2 fagforside
• Genteknologi og bioteknologi — fagtekst
• Bioteknologiske metoder — læringslab
• EcoRI og endetyper: klebrig, butt, 5′ og 3′
• Transformasjon: få plasmidet inn – og finn riktige celler